為什么要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因種子中的Bt基因?轉(zhuǎn)基因種子中的Bt蛋白在人體中能夠蓄積,其長(zhǎng)期毒性不能低估。Bt蛋白可以與哺乳動(dòng)物的腸粘膜細(xì)胞發(fā)生結(jié)合,在高濃度的時(shí)候,可能會(huì)對(duì)哺乳動(dòng)物造成毒性,具有抑制機(jī)體的免疫功能和造血功能,引起自身免疫性疾病等潛在危險(xiǎn)。所以要加強(qiáng)對(duì)種子中Bt基因的檢測(cè)。
種子中Bt基因的檢測(cè)可使用轉(zhuǎn)基因種子檢測(cè)試紙,該類(lèi)試紙應(yīng)用雙抗體夾心免疫層析的原理,在涌動(dòng)過(guò)程中,樣本中的抗原在先膠體金標(biāo)記的抗體A結(jié)合,繼而與檢測(cè)線(xiàn)上特異性單克隆抗體B的結(jié)合形成雙抗體夾心復(fù)合物,如果樣本中抗原含量大于限量,檢測(cè)線(xiàn)顯紅色,結(jié)果為陽(yáng)性,反之,檢測(cè)線(xiàn)不顯色,結(jié)果為陰性。整個(gè)檢測(cè)過(guò)程只需10-15分鐘,適用于各類(lèi)企業(yè)及檢測(cè)機(jī)構(gòu)。
下面,我們來(lái)了解下轉(zhuǎn)基因種子檢測(cè)試紙的使用步驟:
1.【樣品處理】
植物種子:
1.水稻:取 10 粒水稻種子,充分壓碎,轉(zhuǎn)移到做好標(biāo)記的提取管中(注意:充分壓碎能夠提高測(cè)試準(zhǔn)確度),加400µl 緩沖液;(濃度比例按照 10 粒種子加 400µl 緩沖液進(jìn)行),充分溶解。
2.玉米:取 2 粒玉米種子,充分壓碎,轉(zhuǎn)移到做好標(biāo)記的提取管中(注意:充分壓碎能夠提高測(cè)試準(zhǔn)確度),加800µl 緩沖液;(濃度比例按照 2 粒種子加 800µl 緩沖液進(jìn)行),充分溶解。
3.蓋好提取管的蓋子,用力上下振蕩提取管 20~30 秒,確保樣品與緩沖液充分混勻。靜置等待固體物質(zhì)沉淀在管底。
4.請(qǐng)注意不要交叉污染,每個(gè)樣品采用單獨(dú)的提取管。
2.【使用步驟】
測(cè)試前請(qǐng)完整閱讀使用說(shuō)明書(shū),并將試紙和待檢樣本溶液恢復(fù)至常溫。
1、從包裝袋中取出試紙后請(qǐng)盡快使用;
2、將試紙插入提取管中,開(kāi)始計(jì)時(shí);
3、結(jié)果應(yīng)在 10-15 分鐘內(nèi)讀取,其他時(shí)間判讀無(wú)效。
3.【結(jié)果判斷】
陰性(-):C 線(xiàn)顯色,T 線(xiàn)不顯色(測(cè)試線(xiàn),靠近加樣孔一端);
陽(yáng)性(+):C 線(xiàn)顯色,T 線(xiàn)顯色肉眼可見(jiàn)(測(cè)試線(xiàn),靠近加樣孔一端),
無(wú)效:未出現(xiàn) C 線(xiàn),可能操作不當(dāng)或試紙已失效。在此情況下,應(yīng)再次仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū),并用新的試紙重新測(cè)試。

轉(zhuǎn)基因種子檢測(cè)試紙使用說(shuō)明
發(fā)布時(shí)間:2021-06-25 點(diǎn)擊次數(shù):2189 文章來(lái)源:http://www.jianyongkang.cn/
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